dna聚合酶

2018-09-20 自我介绍 阅读:

dna聚合酶(共9篇)

dna聚合酶(一):

DNA聚合酶1的作用是什么?

帮助DNA进行损伤修复,有自我校对功能.一般不是大肠杆菌染色体DNA复制的主要酶

dna聚合酶(二):

DNA解旋酶和DNA聚合酶分别是作用于DNA的哪部分的?

DNA解旋酶是打开DNA的双螺旋结构,在DNA复制或转录时发挥作用
DNA聚合酶 是连接各个脱氧核苷酸的磷酸二酯键的,在DNA复制时作用

dna聚合酶(三):

简述三种DNA聚合酶的作用特点和主要功能

DNA聚合酶(DNA polymerase)是细胞复制DNA的重要作用酶.
DNA聚合酶 ,以DNA为复制模板,从将DNA由5"端点开始复制到3"端的酶.
DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、引物、dNTP等的情况下)及其相辅的活性.
真核细胞有5种DNA聚合酶,分别为DNA聚合酶α(定位于胞核,参与复制引发具5-3外切酶活性),β(定位于核内,参与修复,具5-3外切酶活性),γ(定位于线粒体,参与线粒体复制具5-3和3-5外切活性),δ(定位核,参与复制,具有3-5和5-3外切活性),ε(定位于核,参与损伤修复,具有3-5和5-3外切活性).
原核细胞有3种DNA聚合酶,都与DNA链的延长有关.DNA聚合酶I是单链多肽,可催化单链或双链DNA 的延长;DNA聚合酶II则与低分子脱氧核苷酸链的延长有关;DNA聚合酶III在细胞中存在的数目不多,是促进DNA链延长的主要酶.功能
[1]聚合作用:在引物RNA"-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用.酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有催化作用.dNTP进入结合位点后,可能使酶的构象发生变化,促进3"-OH与5"-PO4结合生成磷酸二酯键.若是错误的核苷酸进入结合位点,则不能与模板配对,无法改变酶的构象而被3"-5"外切酶活性位点所识别并切除之.
[2]3"→5"外切酶活性——校对作用:这种酶活性的主要功能是从3"→5"方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸.当反应体系中没有反应底物dNTP时,由于没有聚合作用而出现暂时的游离现象,从而被3"→5"外切酶活性所降解.如果提高反应体系的温度可以促进这种作用,这表明温度升高使DNA生长链3"末端与模板发生分离的机会更多,因而降解作用加强.当向反应体系加入dNTP,而且只加放与模板互补的上述核苷酸才会使这种外切酶活性受到抑制,并继续进行DNA的合成.由此推论,3"→5"外切酶活性的主要功能是校对作用,当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3"→5"外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸.在某些T4噬菌体突变株中DNA复制的真实性降低,而易发生突变,从此突变株分离得到的T4DNA聚合酶的3"→5"外切酶活性很低.相反,另外一些具有抗突变能力的T4突变株中的T4DNA聚合酶的3"→5"外切酶活性比野生型高得多,因此,其DNA复制真实性好,变异率低.可见,3"→5"外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的.
[3]5"→3"外切酶活性——切除修复作用:5"→3"外切酶活性就是从5"→3"方向水解DNA生长链前方的DNA链,主要产生5"-脱氧核苷酸.这种酶活性只对DNA上配对部份(双链)磷酸二酯键有切割活力作用,方向是5"→3".每次能切除10个核苷酸,而且DNA的聚合作用能刺激5"→3"外切酶活力达10倍以上.因此,这种酶活性在DNA损伤的修复中可能起着重要作用.对冈崎片段5"末端RNA引物的去除依赖此种外切酶活性.
[4]焦磷酸解作用:DNApolⅠ的这种活性可以催化3"末端焦磷酸解DNA分子.这种作用就是无机焦磷酸分解DNA生长链,可以认为是DNA聚合作用的逆反应,而且这种水解DNA链作用需要有模板DNA的存在.(dNMP)n+XPPi←(dNMP)n-x+X(dNPPP)→DNA
[5]焦磷酸交换作用:催化dNTP末端的PPi同无机焦磷酸的交换反应.反应式为32P32Pi+dNPPP←dNP32P32P+PPi→DNA
最后两种作用,都要求有较高浓度的PPi,因此,在体内由于没有足够高的PPi而无重要意义.
DNApolⅠ的DNA聚合酶活性和5"→3"外切酶活性协同作用,可以使DNA链上的切口向前推进,即没有新的DNA合成,只有核苷酸的交换.这种反应叫缺口平移(Nick translation).当双链DNA上某个磷酸二酯键断裂产生切口时,DNApoIⅠ能从切口开始合成新的NDA链,同时切除原来的旧链.这样,从切口开始合成了一条与被取代的旧链完全相同的新链.如果新掺入的脱氧核苷酸三磷酸为α-32P-dNTP,则重新合成的新链即为带有同位素标记的DNA分子,可以用作探针进行分子杂交实验.
尽管DNApolⅠ是第一个被鉴定的DNA聚合酶,但它不是在肠杆菌中DNA复制的主要聚合酶.主要证据如下:[1]纯化的DNApolⅠ催化dNTP掺入的速率为667碱基/分,而体内DNA合成速率要比此高二倍数量级;[2]大肠杆菌的一个突变株中,此酶的活力正常,但染色体DNA复制不正常;[3]而在另一些突变株中,DNApolⅠ的活力中只是野生型的1%,但是DNA复制却正常,而且此突变株增加了对紫外线、烷化剂等突变因素的敏感性.这表明该酶与DNA复制关系不大,而在DNA修复中起着重要的作用.【dna聚合酶】

dna聚合酶(四):

DNA聚合酶的种类

真核细胞有5种DNA聚合酶,分别为DNA聚合酶α(定位于胞核,参与复制引发,不具5"-3"外切酶活性),β(定位于核内,参与修复,不具5"-3"外切酶活性),γ(定位于线粒体,参与线粒体复制,不具5"-3",有3"-5"外切活性),δ(定位核,参与复制,具有3"-5",不具5"-3"外切活性),ε(定位于核,参与损伤修复,具有3"-5",不具5"-3"外切活性).
原核细胞在大肠杆菌中,到目前为止已发现有5种DNA聚合酶,分别为DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ,都与DNA链的延长有关.DNA聚合酶I是单链多肽,可催化单链或双链DNA 的延长,于1956年发现;DNA聚合酶II则与低分子脱氧核苷酸链的延长有关;DNA聚合酶III在细胞中存在的数目不多,是促进DNA链延长的主要酶.DNA聚合酶Ⅳ和Ⅴ直到1999年才被发现.

dna聚合酶(五):

DNA聚合酶的结构和功能【dna聚合酶】

DNA聚合酶主要成分是蛋白质,功能是使DNA复制链与母链结合为双螺旋结构.

dna聚合酶(六):

简述三种DNA聚合酶的作用特点和主要功能

DNA聚合酶1:
1.能催化单个脱氧核糖核苷酸连接到DNA链的3"端.
2.能沿5"端到3"端方向外切DNA(切除引物)
3.能沿3"端到5"端方向外切DNA(纠错,或者说DNA损伤的恢复)
DNA聚合酶2:
1.发挥作用需要镁离子和铵根离子存在
2.同样能参与DNA聚合酶1参与的反应,但聚合活性低
3.能沿3"端到5"端方向外切DNA
DNA聚合酶3:
1.主要负责DNA链的延伸
2.能沿3"端到5"端方向外切DNA
在DNA的复制中,DNA聚合酶3负责合成冈崎片段,而DNA聚合酶1负责将RNA引物按逐个核糖核苷酸切除并替换成对应的脱氧核糖核苷酸,最后由DNA连接酶把各冈崎片段连接起来,复制完成.
活性(37度时每个酶分子每分钟聚合的核苷酸数):DNA聚合酶1为600,DNA聚合酶2为30,DNA聚合酶3为9000.
还有问题的话尽管问.

dna聚合酶(七):

DNA聚合酶III有什么作用?

DNA聚合酶III(Pol III):在大肠杆菌DNA复制过程中起主要作用.
DNA聚合酶III在细胞中存在的数目不多,是促进DNA链延长的主要酶.

dna聚合酶(八):

DNA聚合酶5"-3"和3"-5"是什么意思

5"-3"是DNA合成的方向;3"-5"是校对方向.

dna聚合酶(九):

dna连接酶和dna聚合酶的区别示意图

1
DNA连接酶的化学反应过程,首先是一条DNA的3'端要先修饰成羟基(OH-),而另一条的5'端则是必须带有磷酸,借由DNA连接酶酶的作用促进磷酸二脂键的共价键(covalent bond),同时核苷酸序列以嘌呤—嘧啶两两对应的方式完成配对,这样才算完成反应.用下面这张图解来说明或许可以更清楚的说明反应过程:以黏性末端(sticky end)为例



反应后





2
DNA聚合酶 ,以DNA为复制模板,从将DNA由5开始复制到3'端的酶.DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成.






dna聚合酶

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